用于細(xì)胞外囊泡的分離、檢測(cè)和表征的微流體方法
細(xì)胞外囊泡(EVs)是存在于體液中的細(xì)胞來源的囊泡,其在各種細(xì)胞活動(dòng)過程中起重要作用,例如細(xì)胞間通訊、炎癥、細(xì)胞穩(wěn)態(tài)、存活、轉(zhuǎn)運(yùn)和再生。
圖1:目前的一些細(xì)胞為囊泡分離方法及優(yōu)缺點(diǎn)
從體液中分離和分析細(xì)胞外囊泡具有很大的臨床潛力,可以為各種疾病的進(jìn)展提供信息,如癌癥、心血管并發(fā)癥和炎癥性疾病。盡管目前研究者們對(duì)這一領(lǐng)域產(chǎn)生了越來越多的科研和臨床研究興趣,但仍然沒有可用于對(duì)細(xì)胞外囊泡進(jìn)行純化、檢測(cè)和表征的標(biāo)準(zhǔn)化程序。微流體的進(jìn)步使得化學(xué)制樣具有越來越高的空間分辨率,并且在精細(xì)操作下能達(dá)到單分子水平。在這篇發(fā)表在Biosensors and Bioelectronics雜志(IF=7.476)的綜述中,來自荷蘭烏得勒支大學(xué)(Utrecht University)的研究人員概述了利用微流體技術(shù)分離和檢測(cè)細(xì)胞外囊泡的工作原理和實(shí)例。該綜述還重點(diǎn)提及了用于分離和表征細(xì)胞外囊泡的集成芯片系統(tǒng)。
圖2:基于內(nèi)部和外部的不同特征,使用微流體技術(shù)分離不同的EV群體
綜述內(nèi)容包括:
1 介紹
2 EV分離技術(shù),是EV處理過程中的重要準(zhǔn)備步驟
2.1 傳統(tǒng)的EV分離和分選技術(shù)
2.2 用于EV分離和分選的微流控技術(shù)
2.2.1 EV的芯片分離技術(shù)概述
2.2.2 用于芯片分離EV的集成技術(shù)
3 EV樣品的檢測(cè)
3.1 單峰檢測(cè)技術(shù)
3.1.1 電動(dòng)檢測(cè)
3.1.2 機(jī)械檢測(cè)
3.1.3 光學(xué)檢測(cè)
3.1.4 非光學(xué)檢測(cè)
3.2 多模態(tài)檢測(cè)技術(shù)
3.2.1 電化學(xué)檢測(cè)
3.2.2 掃描離子遮蔽光譜(SIOS)
3.2.3 光電檢測(cè)
4 集成芯片的不同的檢測(cè)和表征部件
5 微流體的高通量能力和標(biāo)準(zhǔn)化
6 總結(jié)、評(píng)論和未來展望
圖3:(A)與激光暗視野顯微鏡集成的毛細(xì)管電泳(μCE系統(tǒng))芯片的示意圖。這是由不同的隔間組成的系統(tǒng),如電極、電源、488nm激光源、電子倍增電荷耦合器件(EM-CCD)照相機(jī)和倒置顯微鏡(Nikon Ti-U)。(B,C)在μCE芯片上,沒有抗原和有抗原的EV的免疫電泳示意圖。
參考文獻(xiàn):Gholizadeh S, Shehata Draz M, Zarghooni M, Sanati-Nezhad A, Ghavami S, Shafiee H, Akbari M. Microfluidic approaches for isolation, detection, and characterization of extracellular vesicles: Current status and future directions. Biosens Bioelectron. 2017 May 15;91:588-605.
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